今天蜗牛号就给我们广大朋友来聊聊二甲基亚砜的作用,以下观点希望能帮助到您。
有没有知道细胞培养用的二甲基亚砜(DMSO)用途的?
答一般二甲基亚砜是加入到细胞冻存培养基重。
细胞冻存时DMSO的浓度一般为10%,之所链敬以加它是因为DMSO是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,减轻自由基对细胞损害,改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。
同时在细胞培养中DMSO一般用迟陵作药物溶剂,要求染毒时其码唤戚浓度不超过1%,也配制成高浓度的母液,稀释时取少量到培养基中。
二甲基亚砜主要的用途?
答二甲基亚砜可乎简作有机溶剂、反应介质和有机合成中间体。也可用作合成纤维的染色溶剂、去染剂、染色载体,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收剂。
二甲基亚砜是一种既溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。广泛用作溶剂和反应试哗腔剂,具有很高的选择抽提能力。二甲基亚砜岁芦裤本身有消炎止痛,利尿,镇静等作用,在医药工业中可以直接用作某些药物的原料及载体。有“万灵药”之称,常作为止痛药物的活性组分添加于药物之中。
扩展资料:
储存方法:
1.该品应密封于阴凉干燥处避光保存。
2.该品采用铝桶、塑料桶或玻璃瓶包装。贮存于阴凉通风干燥处,按易燃有毒物品规定贮运。
毒性:
吸入:高挥发浓度可能导致头痛,晕眩和镇静。
皮肤:能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感,如同所见的皮疹及水泡一样。若二甲基亚砜与含水的皮肤接触会产生热反应。要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液,因其毒性不为人所知,而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤,在一定条件下会将有毒物质带入肌肤。
吸收:吸收危险性很低。
参考资料:百度百科-二甲基亚砜
PCR反应中各种添加剂的作用
答相信大家在做PCR反应时总能遇到这样或是那样的问题,但多数都可以归为两个主要问题:
使用添加剂是解决这些问题的常用策略之一。通常添加剂的作用有两方面:
今天我就简单给大家介绍一下PCR反应中常见的添加剂以及它们的作用。
二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)
DMSO可以降低DNA的二级结构,所以通常在扩增GC含量很高的基因样本的时候都会添加。但是,DMSO 也会大大降低Taq 聚合酶(Taq polymerase)的活性(activity)。所以,升散大家要权衡好模板的接近率(template accessibility)和聚合酶的活性。我建议大家可以尝试不同的DSMO的浓度,例如从2% 到10%,来找出适合自己实验的浓度。
非离子性洗涤剂(Non-ionic detergents)
非离子性洗涤剂,例如0.1-1% 的Triton X-100, Tween 20 或是NP-40,通常可以降低DNA二级结构。虽然这样可以增加模板基因的扩增,但也会带来非特异性扩增的困扰。所以,这些添加剂对无杂物低产量的弊掘PCR反应很管用,但对相对不太纯的PRC反应就没那么好了。非离子性洗涤剂的另外一个好处就是可以减少SDS 污染。通常在DNA提取过程中,SDS会被带到PCR这个步骤,这就大大抑制了聚合酶的活性。所以,反应中加入0.5% 的Tween-20 或是Tween -40 可以中和SDS带来的负面影响。
甜菜碱(Betaine)
甜菜碱可以通过减小二级结构的形成来提高DNA的扩增,并且一般是商用PCR kit的“神秘”添加物。如果大家要用甜菜碱的话,应该放甜菜碱或是一水甜菜碱(Betaine or Betaine mono-hydrate),但不是盐酸甜菜碱(Betaine HCl), 调成最终浓度为1-1.7M 的浓度。甜菜碱还可以帮助提高特异性,因为它能消除DNA融化/变性时对碱基对的依赖(eliminate the base pair composition dependence of DNA melting/DNA denaturation) 。
甲酰胺(Formamide)
甲酰胺是一种常用的有机PCR添加剂。它可以和DNA中的大沟(major groove)和小沟(minor groove)相结合,从而降低母版DNA双螺旋的稳定性并且减低DNA的解链温度(melting temperature)。甲酰胺在PCR实验中使用的浓度通常在1%-5%。
四甲基氯化铵(Tetramethyl ammonium chloride,TMAC)
四甲基氯化铵可以增加杂化的特异性(hybridization specificity)并且提高DNA的解链温度。因此,TMAC 可以去除非特异性的启动,并且减少DNA和RNA的错误结合。如果大家在PCR反应中使用简并引物(degenerate primers)时,记得可以添加TMAC,它常用的使用浓度为15-100mM。
其他常见的添加剂
除了提到的两大类添加剂,PCR反应中还有许多常见的添加剂,虽然作用不同,但也至关重要。
镁离子(Magnesium ion)
镁离子是聚合酶不可缺少的一个辅因子(cofactor),也就是说如果没有镁离子的话,聚合酶是没有活性的。但是,过多的镁离子同样也会影响聚合酶的工作效率。每种PCR反应中镁离子的浓度都不尽相同。螯合剂(Chelating agents,例如EDTA 或是 citrate), dNTP 的浓度和蛋白质都会影响镁离子的浓度。所以,如果你的PCR实验有问题,可以尝试改变不同的镁离子浓度,例如从1.0到4.0mM,中间间隔 0.5–1mM 就可以。
值得租笑核注意的是,多次冻融循环能够导致氯化镁溶液(magnesium chloride)的浓度分层。所以大家在每次使用之前一定要完全溶解,并且混合均匀之后再使用。
牛血清白蛋白(Bovine albumin,BSA)
在分子化学实验中,牛血清白蛋白是很常见的添加剂,尤其在限制酶酶切和PCR的实验中。在PCR反应中,BSA 对于减少污染物,例如酚类化合物(phenolic compounds)有一定帮助。而且也有说法是它能减少反应物附着在试管壁的情况。在PCR反应中,通常BSA添加的浓度可达到0.8 mg/ml。
原文链接:
PCR反应中各种添加剂的作用(上) - BioEngX
PCR反应中各种添加剂的作用(下) - BioEngX
DMSO是什么
答二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide或DMSO),无色液体,重要枝空卖的极性非质子溶剂。它可与许多有机溶剂及水互溶。二甲基亚砜具有极易渗透皮肤的特殊性质,造成使用人员感觉类似牡蛎般的味道。
产品名称:二甲基亚砜
结构简式:(CH3)2-S-O
英文名:Dimethyl sulfoxide
别名:Dimethylsulfoxide; Methyl sulfoxide; Sulfinylbis (methane); DMSO;Me2SO
分子式:C2H6OS
分子量:78.12
CAS:登录号 67-68-5
EINECS:登录号 200-664-3
FEMA:登录号 3875
物理化学性质密度:1.1
熔点:18.4-19.0°C
沸点:189°C
折射率:1.477-1.48
闪点:95°C
燃点:300℃
粘度:1.996mPa·s(25℃)
二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体,是一种吸湿性的可燃液体。具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物,被誉为“万能溶剂”。 二甲基亚砜广泛用作溶剂和反应试剂,特别是丙烯腈聚合反应中作加工溶剂和抽丝溶剂,作聚氨酯合成及抽丝溶剂,作聚酰胺,聚酰亚胺和聚砜树脂的合成溶剂,以及芳烃,丁二烯抽提溶剂和合成氯氟苯胺的溶剂等。除此之外,在医药工业中二甲基亚砜还有直接用作某些药物的原料及载体。二甲基亚砜本身有消炎止痛,利尿,镇静等作用,亦誉为“万灵药”,常作为止痛药物的活性组分添加于药物之中。 DMSO是二甲基亚砜, 用途广泛。用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。对皮肤有极强的渗透性,有助于药物向人体渗透。也可作为农药的添加剂。也是一种十分重要的化学试剂。 DMSO也是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,减轻自由基对细胞损害,改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。 但研究表明,DMSO存在一定的毒性作用,与蛋白质疏水集团发生作用,导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性。 DMSO存在一定的毒性作用,用的时候要避免其挥发,要准备1%-5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤. 最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤、和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。 亏坦吸入:高挥发浓度可能导致头痛,晕眩和镇静。 皮肤:能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感,如同所见的皮疹及水泡一样。若二甲基亚砜与含水的皮肤接触会产生热反应猛逗。要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液,因其毒性不为人所知,而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤,在一定条件下会将有毒物质代入肌肤。 吸收:吸收危险性很低。
从上文,大家可以得知关于二甲基亚砜的作用的一些信息,相信看完本文的你,已经知道怎么做了,蜗牛号希望这篇文章对大家有帮助。