网上有很多关于什么是PCR实验的知识，也有很多人为大家解答关于pcr实验室的问题，今天小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!
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一、什么是PCR实验
一、什么是PCR实验
PCR是一种体外DNA扩增技术，它依靠DNA聚合酶在模板DNA、引物和四种脱氧核苷酸存在下的酶促反应，使待扩增的DNA片段经过多次“高温变性、——低温退火、——引物延伸”三步反应，使DNA片段数量呈指数级增长，从而在短时间内获得大量我们需要的特定基因片段。
PCR由三个基本反应步骤组成：变性-退火-延伸：模板DNA的变性：模板DNA加热到93左右一定时间后，模板DNA的双链DNA或PCR扩增的双链DNA解离成单链，从而可以与引物结合，为下一轮反应做准备；(2)模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA加热变性成单链后，降温至55左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对；引物延伸：DNA模板-引物偶联物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，根据碱基配对和半保守复制的原理，合成一条与模板DNA链互补的新的半保守复制链，重复循环变性-退火-延伸三个过程，可以得到更多的“半保守复制链”，这条新链可以作为下一个循环的模板。完成一个循环需要2 ~ 4分钟，待扩增的目的基因在2 ~ 3小时内可扩增百万倍。达到平台所需的循环次数取决于样品中模板的拷贝数。
标准PCR反应体系：10扩增缓冲液、10 ul四种dNTP混合物、每种引物200umol/L、10 ~ 10~100pmol模板DNA、0.1 ~ 2ug Taq DNA聚合酶、2.5 ug Mg2、1.5 mmol/L双或三重蒸馏水至100 ul PCR反应。参与PCR反应的物质主要有五种，分别是引物、酶、dNTP、模板和Mg2。
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